紫外可見分光光度法的定量分析基礎說明
點擊次數(shù):5368 更新時間:2020-08-30
紫外可見分光光度計是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。
紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比,其數(shù)學表示式如下:
A=錬c
式中:A—吸光度(又稱光密度、消光值),
å—摩爾吸光系數(shù)(其物理意義為:當吸光物質(zhì)濃度為1摩爾/升,吸收池厚為1厘米,以一定波長原光通過時,所引起的吸光值A),b—吸收介質(zhì)的厚度(厘米),c—吸光物質(zhì)的 濃度(摩爾/升)。
物質(zhì)的顏色和它的電子結(jié)構(gòu)有密切的關系,當輻射(光子)引起電子躍遷使分子(或離子)從基 態(tài)上升到激發(fā)態(tài)時,分子(或離子)就會在可見區(qū)或紫外呈現(xiàn)吸光,顏色的發(fā)生或變化是和分 子的正常電子結(jié)構(gòu)的變形聯(lián)系的。當分子中含有一個或更多的生色基因(即具有不飽和鍵的 原子基團),輻射就會引起分子中電子能量的改變。常見的生色團有:
CO, -N=N-, -N=O,-C N,CS
如果兩個生色團之間隔一個碳原子,則形成共軛基團,會使吸收帶移向較長的波長處(即紅 移),且吸收帶的強度顯著增加。當分子中含有助色基團(有未共用電子對的基團)時,也會 產(chǎn)生紅移效應。常見的助色基團有:-OH -NH2, -SH, -Cl, -Br, -I
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